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留学学者讲坛第十八讲(3.27)—Cloning and Function Analysis of Ubiquitin-Activating Enzyme ( E1) in Tomato (Lycopersicon Esculentum)

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留学学者讲坛第十八讲(3.27)—Cloning and Function Analysis of Ubiquitin-Activating Enzyme ( E1) in Tomato (Lycopersicon Esculentum)

发布时间:2014-03-27      作者:

    主讲:陈选阳副研究员

    时间:3月27日(周四)下午2:00-3:00

    地点:作物学院三楼302室

    组织单位:作物学院/教务处

    组织电话:83789483 /83789235

    简介

    泛素在一系列泛素化途径相关酶(E1、E2、E3)的作用下结合到靶蛋白,被修饰的蛋白可以通过26S蛋白酶体分解为较小多肽、氨基酸以及可以重复使用的泛素。克隆出番茄中的2个 E1基因,分别构建的原核表达载体,体外表达并纯化了蛋白。应用Western杂交,进行了番茄E1与E2体外thioester 分析,研究了番茄两个E1酶结合E2的活性及其差异。在烟草和番茄中进行了VIGS研究,经过半定量RT-PCR分析,成功地沉默了烟草clubE1-09基因,获得了特异性的表型,与对照相比,基因沉默植株生长发育过程受到了严重影响,植株叶片偏黄,上、中、下部叶片均偏小,茎杆变细,虽能正常开花,但不能正常结果。在番茄中未能获得相关基因沉默的植株。